纳豆芽孢杆菌gudB1-GDH对低氨发酵的分子调控机理

项目名称： 纳豆芽孢杆菌gudB1-GDH对低氨发酵的分子调控机理

项目编号： No.31171737

项目类型： 面上项目

立项/批准年度： 2012

项目学科： 农业科学

项目作者： 张建华

作者单位： 上海交通大学

项目金额： 65万元

中文摘要： 纳豆芽孢杆菌谷氨酸脱氢酶(GDH)由rocG和gudB1基因编码，是连接碳氮代谢的关键酶，对该菌的生长和产氨都有明显的影响。本课题拟通过基因敲除、定点突变和同源重组，获得rocG和gudB1双缺失及rocG缺失、gudB1定点突变的系列菌株。以野生型和双缺失型菌株为对象，利用13C标记葡萄糖，结合GC-MS检测技术和FiatFlux软件分析技术，对胞内的代谢流量进行分析，结合胞外代谢物含量的检测结果，构建并优化GDH缺失菌株的碳氮中心代谢网络模型。分析具有不同gudB1-GDH酶活的系列突变株的生物量、产氨量、代谢流量分布等数据，构建描述碳/氮源、代谢流量、产氨量与菌体生长间关系的数学模型。同时比较分析不同菌株间关键酶活性、关键酶基因和主要代谢调控基因转录水平的差异，揭示gudB1-GDH在碳氮中心代谢中代谢调控机理，为低产氨纳豆芽孢杆菌的选育提供思路。

中文关键词： 纳豆芽孢杆菌；谷氨酸脱氢酶；基因敲除；脲酶；定点突变

英文摘要：

英文关键词： Bacillus subtilis natto；Glutamate dehydrogenase；gene knockout；urease；site directed mutagenesis