早酥梨红皮芽变突变的分子机制及相关基因的克隆和功能研究

项目名称： 早酥梨红皮芽变突变的分子机制及相关基因的克隆和功能研究

项目编号： No.31171925

项目类型： 面上项目

立项/批准年度： 2012

项目学科： 农业科学

项目作者： 徐凌飞

作者单位： 西北农林科技大学

项目金额： 58万元

中文摘要： 红皮梨育种是国际梨育种的一个主要目标。梨红皮性状突变机制及其相关基因的克隆和功能研究对于红皮梨分子育种具有重要意义。理想红皮梨种质相对匮乏，早酥梨红皮芽变是开展其研究的理想材料。 本研究以特有的早酥梨红皮芽变和母株为试材，一方面利用抑制性差减杂交技术，构建差减文库，筛选差异表达克隆进行序列测定和分析，鉴定和分析差异表达基因，然后选取相关ESTs进行表达分析,扩增相关基因全长cDNA并构建载体转化烟草进行功能验证；另一方面利用差异蛋白组学技术，提取材料蛋白质和IEF/SDS-PAGE双向凝胶电泳分离蛋白质，利用肽质量指纹谱和生物信息学方法鉴定差异蛋白质，获取与红皮性状相关的标志性蛋白质并进行表达和功能验证。项目比较芽变与母体间的mRNA 和蛋白质以获得差异表达的基因克隆和蛋白质，分析突变发生的分子机制，同时进行相关目的基因克隆和功能研究，为梨红皮性状遗传和红皮梨分子育种研究奠定基础。

中文关键词： 红皮梨芽变；差减文库；差异蛋白质组学；突变分子机制；基因功能

英文摘要：

英文关键词： red skin pear mutant；SSH library；differential proteomics；mutation molecular mechanism；gene function