高灵敏度恒温扩增检测端粒酶活性及端粒酶抑制剂的筛选

项目名称： 高灵敏度恒温扩增检测端粒酶活性及端粒酶抑制剂的筛选

项目编号： No.21405032

项目类型： 青年科学基金项目

立项/批准年度： 2014

项目学科： 数理科学和化学

项目作者： 贾红霞

作者单位： 河北大学

项目金额： 25万元

中文摘要： 端粒酶是一种具有反转录活性的核糖核蛋白酶，它可以以自身的RNA为模板，使染色体DNA的端粒不断复制。一般在肿瘤细胞中端粒酶活性被激活，它与染色体DNA端粒的不断复制及肿瘤的不断增值密切相关。所以检测端粒酶活性可能实现对肿瘤、癌症的早期诊断；同时研究端粒酶活性抑制剂对抗肿瘤药物的开发具有非常重要的意义。恒温指数扩增反应（IEXPAR）是一种新型的、快速的、恒温扩增方法，其扩增效率可与PCR相媲美。本项目研究拟通过对端粒酶延伸产物特异性的DNA探针进行恒温指数放大，利用SYBR Green I为染料对扩增产物进行实时定量荧光检测。以期利用简单快速的操作，实现端粒酶活性的高灵敏度检测。同时，利用简单的磁分离技术将端粒酶的延伸反应与DNA探针的扩增反应分开，有效的避免了端粒酶抑制剂对后续扩增反应及检测的影响，从而提高了端粒酶抑制剂筛选的可靠性。

中文关键词： 端粒酶活性；恒温指数扩增反应；环介导等温扩增；杂交链式反应；

英文摘要： Telomerase is a ribonucloprotein with reverse transcriptase activity, which can elongate the telomeric sequences of chromosomes with its own RNA as a template. Telomerase is activated in the tumour cells，which is associated with the replicate of telomeres

英文关键词： Telomerase activity；Isothermal exponential amplification reaction；Loop-mediated isothermal amplification；Hybrid chain reaction；