基于微流控温度梯度毛细管电泳的基因突变及甲基化联合检测系统的建立

项目名称： 基于微流控温度梯度毛细管电泳的基因突变及甲基化联合检测系统的建立

项目编号： No.30901727

项目类型： 青年科学基金项目

立项/批准年度： 2010

项目学科： 金属学与金属工艺

项目作者： 张惠丹

作者单位： 中国医科大学

项目金额： 20万元

中文摘要： 基因突变和DNA甲基化是肿瘤早期诊断和筛查的重要分子标志物。最新研究表明，不同肿瘤个体中基因突变和甲基化存在广泛异质性，因此，两者的联合检测可有效提高肿瘤的阳性检出率。但目前常规的基因突变或甲基化检测方法存在样品需要量大，操作繁琐，耗时过长，费用高等问题，同时也不适合两者的联合检测。为此，本研究提出利用微流控芯片技术样品消耗少，分析速度快，费用低的优势实现高效检测。同时利用亚硫酸氢盐将靶序列中CpG位点甲基化状态差异转化成核苷酸点突变，将申请者前期创建的可检测基因突变的微流控温度梯度毛细管电泳系统（TGCE）用于甲基化检测，并通过集成阵列通道，创建能同时检测多基因突变及甲基化的阵列式TGCE微流控技术平台，以大肠癌患者的粪便脱落细胞为材料，以4个大肠癌较常发生的K-ras、p53基因突变及p16、hMLH1基因启动子甲基化作为检测对象，为高效进行肿瘤的无创性诊断和筛查提供新的方法。

中文关键词： 甲基化；突变；集成化微流控芯片；温度梯度毛细管电泳；大肠癌

英文摘要：

英文关键词： Methylation；Mutation；Integrated microfluidic chip；Temperature gradient capillary；Colorectal cancer