基于液滴微反应器的集成化PCR-RFLP基因突变检测平台的建立及在大肠癌靶向治疗中的应用

项目名称： 基于液滴微反应器的集成化PCR-RFLP基因突变检测平台的建立及在大肠癌靶向治疗中的应用

项目编号： No.21375149

项目类型： 面上项目

立项/批准年度： 2013

项目学科： 数理科学和化学

项目作者： 方瑾

作者单位： 中国医科大学

项目金额： 80万元

中文摘要： 分子靶向治疗是目前大肠癌最有效的治疗策略，但如果病人的某些基因存在突变，则靶向治疗无效，因此，亟需发展高效的检测方法筛查病人的基因突变状态，以准确指导临床个体化的用药。目前采用的突变检测方法存在灵敏度低、样品用量大、操作繁琐费时等问题，而且难以对相关的多个基因进行同时检测。为此，前期工作将基因突变检测方法PCR-RFLP中的电泳分离操作移植到微流控芯片上进行，显著提高了突变检测灵敏度。为了进一步提高其对微量样品的快速检测能力和多指标平行分析能力，本研究拟利用微流控液滴技术能够连续操控多个不同微反应单元的优势和高通量分析能力，创建基于液滴的集成化PCR-RFLP系统，即自动化完成基于液滴的微量DNA样品前处理；连续完成多样品阵列式液滴PCR扩增和酶切反应；进行液滴内多样品的连续自动进样和毛细管电泳分析。应用于大肠癌肿瘤组织和血液中靶向治疗相关基因的检测，为指导肿瘤个体化治疗提供高效技术平台。

中文关键词： 液滴阵列；基因突变；大肠癌；PCR-RFPL；高通量

英文摘要： Molecular targeted therapy is currently the most effective way of treating metastatic colorectal cancer. Because the patients harboring mutations in genes such as K-ras cannot benefit from the treatment, it is necessary to develop highly effective detecti

英文关键词： Droplet array；Gene mutation；Colorectal cancer；PCR-RFPL；High throughput