肿瘤表面糖蛋白的快速分离与鉴定

项目名称： 肿瘤表面糖蛋白的快速分离与鉴定

项目编号： No.30900256

项目类型： 青年科学基金项目

立项/批准年度： 2010

项目学科： 生物科学

项目作者： 张奇

作者单位： 南开大学

项目金额： 20万元

中文摘要： 肿瘤细胞表面糖蛋白的结构和功能在肿瘤免疫中有着重要作用，因此开展肿瘤相关糖蛋白的研究一直是肿瘤分子生物学关注的焦点。本研究从肿瘤细胞表面糖蛋白的研究方法入手，建立一套N-糖基化糖蛋白的特异性分离和鉴定方法，为开展肿瘤糖蛋白质组学的研究提供有效的技术支撑。本研究首先利用代谢标记技术，采用自行合成的含有叠氮基团的乙酰化葡萄糖和甘露糖分别培养肿瘤细胞，使细胞表面的糖蛋白被含叠氮基团的糖转糖基化；随后同自行合成的炔基化亚氨基生物素进行点击化学反应，使膜上的糖蛋白生物素化；生物素化的糖蛋白借助于链霉亲和素固定化的磁性微球进行分离；分离的糖蛋白进而通过二维电泳、质谱解析完成对其的筛选及鉴定工作。本研究应用化学生物学、蛋白质组学、糖生物学等基本理论，结合代谢标记、点击化学和磁性分离技术，探讨肿瘤细胞表面糖蛋白的分离鉴定方法，为肿瘤相关糖蛋白质组学的研究提供技术支持，具有重要的理论和应用价值。

中文关键词： 糖蛋白；点击化学；代谢标记；唾液酸；纳米颗粒

英文摘要：

英文关键词： Glycoprotein；Click chemistry；Metabolic labeling；Sialic acid；Nanoparticles