副溶血性弧菌转录调控子OpaR的功能研究

项目名称： 副溶血性弧菌转录调控子OpaR的功能研究

项目编号： No.31170127

项目类型： 面上项目

立项/批准年度： 2012

项目学科： 微生物学、植物学

项目作者： 周冬生

作者单位： 中国人民解放军军事医学科学院

项目金额： 56万元

中文摘要： OpaR是副溶血性弧菌密度感应系统的核心调控子，目前对其功能的认识还很肤浅。本研究系统分析野生株、ΔopaR突变株、回补株的体外生长特性、相关生化特征、动物毒力、生物膜形成、泳动能力、群集性爬动等表型的基础上，采用DNA芯片比较转录组分析技术，结合生物信息学预测，鉴定OpaR的调控元，证实OpaR是个整体调控子控制着众多细胞途径；进而运用定量RT-PCR和凝胶阻滞实验技术，鉴定OpaR直接调控的靶基因；汇总毒力、生物膜、鞭毛、荚膜多糖合成相关基因，并加上OpaR自身结构基因，采用LacZ融合报告基因技术、引物延伸实验技术、DNA酶I足迹实验技术，深入研究OpaR是否并如何直接调控相应基因的转录；最后，将表型和分子实验数据结合起来，认识OpaR是如何通过调控自身编码基因、荚膜多糖合成基因、某些关键毒力基因、鞭毛基因的转录，实现自我调控，同时控制着毒力、生物膜形成能力、运动性。

中文关键词： 副溶血弧菌；密度感应系统；转录调控；OpaR；AphA

英文摘要：

英文关键词： Vibrio parahemolyticus；quorum sensing system；transcriptional regulation；OpaR；AphA