猪细小病毒强弱毒差异的分子基础及其宿主细胞转录效应研究

项目名称： 猪细小病毒强弱毒差异的分子基础及其宿主细胞转录效应研究

项目编号： No.31172341

项目类型： 面上项目

立项/批准年度： 2012

项目学科： 畜牧学与草地科学、兽医学、水产学

项目作者： 刘业兵

作者单位： 中国兽医药品监察所

项目金额： 62万元

中文摘要： 为了解猪细小病毒强弱毒毒株的分子特征及其感染ST细胞后宿主细胞基因转录的差异，本研究拟从实验室保存的国内外PPV强弱毒株和分离株入手，采用精细短链测序shut down技术，完成PPV全基因组的序列测定，分析VP1/VP2区碱基缺失、3'及5'端的十字鼓瓶颈发卡结构与病毒致病力变化的关系，探讨PPV强弱毒株致病性差异的分子基础；建立区分强弱毒的多重PCR方法，研究强弱毒株在动物体内不同组织间的分布；应用荧光定量PCR检测强弱毒各转录本在ST细胞增殖过程中的动态变化，分析强弱毒在细胞中的增殖速率与相应基因位点的关系；用SSH技术分析不同毒力PPV感染ST细胞后细胞mRNA转录差异的cDNA文库，用Northern印迹杂交和荧光定量PCR鉴定差异基因及其mRNA的丰度，了解PPV强弱毒感染细胞后宿主细胞基因转录的差异，为探究PPV毒力差异的分子机理及相关蛋白在致病中所发挥的作用奠定重要基础。

中文关键词： 猪细小病毒；宿主细胞；基因组；致病力；差异基因

英文摘要：

英文关键词： Porcine parvovirus；host cells；genome；virulence；differential genes