项目名称: 食品中Bt Cry毒素检测用广谱抗体的制备研究
项目编号: No.31371778
项目类型: 面上项目
立项/批准年度: 2013
项目学科: 农业科学
项目作者: 刘贤金
作者单位: 江苏省农业科学院
项目金额: 87万元
中文摘要: 本研究针对转基因食品中苏云金杆菌(Bt)Cry毒素种类较多,当前食品安全监管急需广谱筛查技术的突出问题。拟发挥基因工程抗体易于定向修饰及Cry毒素具有相似结构的特点,以前期获得的几种Bt Cry1类毒素单链抗体基因为材料,先通过分子对接技术模拟抗体关键氨基酸识别位点,并以此为基础,采用定点突变、链置换等基因操作手段,分别设计、构建3种大容量突变抗体库。再利用Cry毒素共性结构域包被或抗原交替筛选方法,初步获得20-30个能识别Cry毒素的突变抗体株,并通过高通量Biacore分析,采用多种Cry毒素材料验证筛选,最终获得3-4个广谱抗体,检测对象可覆盖10种左右Cry 毒素。探索广谱抗体识别区的分子结构特性,并为Bt毒素基因工程抗体的体外定向修饰和高灵敏、广谱筛选检测方法建立奠定基础。
中文关键词: Bt Cry 毒素;单克隆抗体;噬菌体展示抗体;广谱抗体;分子对接
英文摘要: More and more genes of Bt Cry toxins are being employed in transgenic plant breeding. Immunoassay technology based on monoclonal or polyclonal antibodies of the single Cry toxin can't meet the requirements of the huge amount of sample screening, neither i
英文关键词: Bt Cry toxins;Monoclonal antibody;Phage display antibody;Brod specific antibodies;Molecular docking