项目名称: 斑马鱼与原始生殖细胞迁移相关新基因的克隆及功能研究

项目编号: No.30871407

项目类型: 面上项目

立项/批准年度: 2009

项目学科: 生物科学

项目作者: 邓凤姣

作者单位: 武汉大学

项目金额: 29万元

中文摘要: 脊椎动物原始生殖细胞(PGCs)迁移分子机理的研究是发育学领域研究热点之一。本项目拟采用酵母双杂交技术,从斑马鱼早期胚胎cDNA文库中,筛选与PGCs迁移相关调控因子(Nanos1、Pumilio和SSB4)相互作用蛋白;用GST Pull-down和免疫共沉淀等方法,分别确定Nanos1、 Pumilio和SSB4与侯选因子之间的相互作用及其结合区域,探讨它们所涉及的局部信号调控网络;运用3'、5'RACE和生物信息学等方法,研究候选基因结构的特点;通过mRNA原位杂交和免疫组织化学等方法,检测其mRNA和蛋白质在斑马鱼早期胚胎发育过程中的时空表达谱;采用吗啉环、RNA干扰和过表达显性抑制等技术,研究候选基因的功能。完成本项目,将可能发现与PGCs迁移相关的重要的、新的基因;为研究调控动物性细胞迁移的分子机理提供重要的基础资料;为人类生殖细胞肿瘤发生的机理提供重要的启示。

中文关键词: 斑马鱼; PGCs; 酵母双杂交;调控基因; 蛋白质相互作用.

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