用于细胞与活体中超氧阴离子实时、原位动态监测的新型基因编码荧光探针的制备及应用

项目名称： 用于细胞与活体中超氧阴离子实时、原位动态监测的新型基因编码荧光探针的制备及应用

项目编号： No.21405097

项目类型： 青年科学基金项目

立项/批准年度： 2014

项目学科： 数理科学和化学

项目作者： 王慧

作者单位： 山东师范大学

项目金额： 25万元

中文摘要： 细胞在新陈代谢过程中，会产生各种微量的自由基，其中活性氧自由基是机体内最常见的自由基。大量的研究证据表明，癌症等许多重大疾病的发生发展与细胞内活性氧水平的改变密切相关。为解决细胞、活体内自由基实时、原位、长时间的过程监测，本项目提出利用醛基与氧氨基在生物体内可发生生物正交反应这一特点，对增强型绿色荧光蛋白（EGFP）进行基因修饰，制备可对ROS中重要的也是其它活性氧生成的前驱体-超氧阴离子自由基发生化学发光反应的新型基因编码的荧光探针。该探针在融合了化学发光探针的无需激发光源、低背景、高灵敏度、瞬时检测等优点外，还具有更低的细胞毒性，更高的量子产率，可以实现单细胞成像及组织深度成像。由于EGFP在细胞中可以持续表达，此探针便于无激发光源长期检测组织中活性氧的变化，可以实现对肿瘤形成过程中活性氧水平变化的实时原位检测。项目提出也是自由基生物定量精准分析的新策略与新途径。

中文关键词： 化学发光探针；白三烯A4水解酶；荧光探针；绿色荧光蛋白；钙离子

英文摘要： In cells, various free radicals are generated in the course of biological metabolism, while the most common ones are reactive oxygen species (ROS). A massive study shows that the genesis and development of many major diseases including tumor is closely re

英文关键词： chemiluminescence probe；LTA4H；Fluorescence probe；GFP；Calcium ion