PCR比色核酸探针在病原诊断中的应用

项目名称： PCR比色核酸探针在病原诊断中的应用

项目编号： No.21172215

项目类型： 面上项目

立项/批准年度： 2012

项目学科： 数理科学和化学

项目作者： 唐卓

作者单位： 中国科学院成都生物研究所

项目金额： 60万元

中文摘要： 探索酶催化扩增和比色探针结合进行基因扩增和检测的新方法，替代现有的荧光探针为主的基因检测方法。将具有类似过氧化物酶活性核酶应用于PCR比色探针设计中，结合DNA聚合酶的5'-3'外切酶活性进行基因检测策略设计，在PCR扩增过程中特性性地对探针进行剪切，引发随后的核酶扩增和显色反应实现DNA病原的比色检测；通过引入具有逆转录活性的DNA聚合酶 Taq M1一步法对RNA的扩增，和比色探针检测方法联用便实现对RNA病原进行检测；采用3+1的非对称核酶分解方式将核酶引入比色探针，应用于单核苷酸多态性SNP的PCR-LDR检测中，依靠DNA链接酶对碱基错配的高灵敏度实现特性的链接反应，从而引发随后的核酶扩增和显色反应达到对SNP的检测。通过本项目的研究，建立起针对DNA、RNA和SNP病原比色检检测方法。用更加高效、准确和价廉的基因比色检测方法，提高医学检测效率，降低医疗检测成本。

中文关键词： 核酶；比色核酸探针；核酸检测；中药质量控制；体外筛选

英文摘要：

英文关键词： Ribozyme；colorimetric nucleic acid probe；nucleic acid detection；Chinese medicine quality control；in vitro selection