黏玉米来源的TGase定向改造及在巴氏毕赤酵母中高效表达

项目名称： 黏玉米来源的TGase定向改造及在巴氏毕赤酵母中高效表达

项目编号： No.30972041

项目类型： 面上项目

立项/批准年度： 2010

项目学科： 生物科学

项目作者： 张兰威

作者单位： 哈尔滨工业大学

项目金额： 30万元

中文摘要： 谷氨酰胺转氨酶（TGase）是一种催化酰基转移反应的转移酶，广泛存在动植物与微生物中。作为食品添加剂，TGase已经显示出天然安全、高效的重要价值。本课题组前期研究发现，黏玉米TGase在增加面筋强度、改进酸奶质、提高肉的凝胶性方面明显优越于茂源链轮丝菌TGase ，但同样存在热稳定性和pH值适应性较低问题，局限了该酶的应用范围。 在前期研究工作基础上，本研究以黏玉米来源的TGase为研究对象，将蛋白质工程和生物信息学相结合，定点突变该TGase，进一步提高酶的催化效率和酶稳定性，为该酶的更为广泛应用搭建技术平台。同时以食品发酵工业重要菌株－巴氏毕赤酵母为宿主，构建含有优化的突变酶的表达载体，构建食品级谷氨酰胺转氨酶的高效工程菌株，为其大规模生产和应用奠定基础。

中文关键词： 谷氨酰胺转氨酶；黏玉米；毕赤酵母；定向改造；高效表达

英文摘要：

英文关键词： Tgase；waxy；pichia pastoris；directed evolution；high expression