噬菌体MmP1早期基因的鉴定及其在寄生宿主中作用研究

项目名称： 噬菌体MmP1早期基因的鉴定及其在寄生宿主中作用研究

项目编号： No.31170159

项目类型： 面上项目

立项/批准年度： 2012

项目学科： 微生物学、植物学

项目作者： 朱军民

作者单位： 中国人民解放军第三军医大学

项目金额： 62万元

中文摘要： 噬菌体是感染细菌的病毒，有望作为临床耐药菌感染的治疗剂而具有重要研究价值。噬菌体侵入敏感宿主后，早期即可表达一些基因，能迅速控制宿主菌生长，为其自身的复制创造适宜环境。因此噬菌体关闭宿主代谢功能的基因常常是一些早期基因，但噬菌体极富多样性,目前对噬菌体早期基因的认识还非常有限。MmP1是我室分离的一株耐药摩氏摩根菌噬菌体，全基因组测序证实其为T7家族新成员，预测的早期基因有12个，9个功能未知。本项目拟用RT-PCR方法鉴定MmP1早期基因表达，根据实验分析选择其中4个分别构建诱饵质粒，与宿主基因组表达文库进行细菌双杂交，从宿主全基因组水平筛选与MmP1早期蛋白相互作用分子，进行测序和信息学分析，再对宿主菌中的靶基因分别实施敲除，构建突变菌株，观察其对MmP1感染的影响，从噬菌体早期基因与宿主功能基因相互作用角度探讨MmP1寄生宿主菌的机制，为筛选新的摩氏摩根菌治疗剂提供靶点和依据。

中文关键词： 噬菌体；早期基因；细菌双杂交；基因组测序；RNA-seq

英文摘要：

英文关键词： Bacteriophages；Early gene；Bacterial two-hybrid assay (B2H)；Genomic sequencing；RNA-seq