产气荚膜梭菌α27602;素分子结构与生物学功能定位的研究

项目名称： 产气荚膜梭菌α27602;素分子结构与生物学功能定位的研究

项目编号： No.30972188

项目类型： 面上项目

立项/批准年度： 2010

项目学科： 生物科学

项目作者： 许崇波

作者单位： 大连大学

项目金额： 30万元

中文摘要： α27602;素是产气荚膜梭菌最主要致病因子，是一种依赖锌离子的单链多肽金属酶，具有磷脂酶C活性、鞘磷脂酶活性、溶血活性和致死性等，但α27602;素生物学功能位于多肽的部位以及分子结构和生物学功能之间的关系尚不清楚。本项目拟构建α27602;素氨基端、羧基端和对在α27602;素生物学功能中起关键作用的氨基酸残基进行定点突变。在此基础上，一方面，将α27602;素氨基端、羧基端、突变体分别与具有中和磷脂酶C活性和溶血活性的抗α27602;素单抗孵育，进行孵育前后的生物学功能检测；另一方面，用圆二色谱仪和快速停留仪测定α27602;素氨基端、羧基端、突变体的二级结构和快速折叠动力学，并与α27602;素本身结构进行比较，观察结构变化对其生物学功能的影响；最后利用核磁共振技术和ICP光谱技术，确定锌离子和α27602;素酶活性中心的作用位点。通过上述研究，阐明α27602;素生物学功能定位在单链多肽的部位及其分子结构和生物学功能的关系，为进一步研究α27602;素分子作用机制提供理论依据。

中文关键词： A型产气荚膜梭菌α27602;素；定点突变；分子结构；圆二色光谱；生物学功能

英文摘要：

英文关键词： Alpha–oxin of C. perfringens；Site-directed mutagenesis；Molecular structure；Circular dichroism (CD) spectr；Bilogical Function