单细胞数字PCR技术用于肺癌循环肿瘤细胞的鉴定分析

项目名称： 单细胞数字PCR技术用于肺癌循环肿瘤细胞的鉴定分析

项目编号： No.21375119

项目类型： 面上项目

立项/批准年度： 2013

项目学科： 数理科学和化学

项目作者： 姚波

作者单位： 浙江大学

项目金额： 80万元

中文摘要： 肺癌是常见的恶性肿瘤之一，现有的诊断技术难以达到早期诊断的目的，是该疾病的死亡率居高不下的重要原因。鉴于此，我们提出一种以循环肿瘤细胞（CTC）为研究对象的单细胞数字PCR基因分析技术。该技术从分子生物学角度出发，结合微流控芯片的技术优势，在单细胞水平研究肿瘤细胞的基因表达、突变情况以及CTC的异质性。该课题主要包括三部分工作，首先采用梯度离心、免疫分离和免疫荧光技术从血液样本中分离富集CTC。接着借助荧光成像技术寻找免疫荧光标记阳性的CTC以及不具有癌症标记物抗原的CTC。通过毛细管显微操作技术将单细胞逐个取出。最后，采用数字PCR技术对单细胞内肿瘤基因的表达水平和突变情况进行分析。本项目提出以血液中的CTC为研究对象，相对于直接对血液样本进行分析更加准确可靠，本项目的成果将有助于提高微创检测技术用于模癌症筛研究的准确性和实用性，为肺癌早期诊断和个体化治疗提供新的技术平台和重要信息。

中文关键词： 液滴微流控；单细胞分析；microRNA；PCR；基因分析

英文摘要： In recent years, lung cancer has become the most common cause of cancer-related death in human beings. Overall, no more than 15% of people diagnosed with lung cancer per year survive five years after the diagnosis. The existing techniques for lung cancer

英文关键词： droplet microfluidics；single cell analysis；microRNA；PCR；gene analysis