核酸蛋白探针双识别生物传感检测DNA甲基化的研究

项目名称： 核酸蛋白探针双识别生物传感检测DNA甲基化的研究

项目编号： No.30972821

项目类型： 面上项目

立项/批准年度： 2010

项目学科： 医药、卫生

项目作者： 潘世扬

作者单位： 南京医科大学

项目金额： 30万元

中文摘要： DNA甲基化所致的抑癌基因沉默是肿瘤发生的关键因素。甲基化异常在早期癌,甚至癌前病变即已出现。抑癌基因甲基化检测，有助于肿瘤早期诊断。传统的甲基化检测方法操作繁琐，稳定性差。本研究拟建技术方案摈弃传统的以亚硫酸氢盐化学修饰和酶切为基础的DNA甲基化检测思路，设想以生物传感器为检测平台，建立基于核酸探针和甲基化CpG结合蛋白双识别的DNA甲基化检测技术。首先以表面等离子共振（SPR）生物传感器芯片表面包被的特异性核酸探针识别待测基因启动子区核酸序列，继而以甲基化CpG结合蛋白识别其中含甲基化的部分，经胶体金修饰的结合蛋白可使SPR信号放大；对于甲基化阳性的样本，芯片表面形成核酸探针－甲基化核酸片段－甲基化CpG结合蛋白"三明治"样复合物；最终分析SPR角的变化，进行甲基化目的基因的检测。本技术简便、快捷、灵敏，特异，有望为早期发现肿瘤提供有效的检测方法，并开拓甲基化检测研究新的技术领域。

中文关键词： 甲基化；甲基化CpG结合域；表面等离子共振；生物传感器；抑癌基因

英文摘要：

英文关键词： methylation；methyl-CpG-binding domain；surface plasmon resonance；biosensor；tumor suppressor gene