异体骨肉瘤细胞mRNA电转染的大鼠树突状细胞诱导抗骨肉瘤主动免疫效应的实验研究

项目名称： 异体骨肉瘤细胞mRNA电转染的大鼠树突状细胞诱导抗骨肉瘤主动免疫效应的实验研究

项目编号： No.30901505

项目类型： 青年科学基金项目

立项/批准年度： 2010

项目学科： 生物科学

项目作者： 于哲

作者单位： 中国人民解放军第四军医大学

项目金额： 22万元

中文摘要： 在国科金重点项目"恶性骨肿瘤个体化综合治疗的应用基础研究"中，我们采用电融合方法成功地制备了异体树突状细胞与大鼠骨肉瘤融合瘤苗，该瘤苗在体外实验和体内主动免疫治疗实验中都诱导出特异性抗骨肉瘤免疫效应。但是，由于DC融合细胞体外制备培养繁琐、扩增有限；且DC经融合电流冲击后，活性减低，难以质控，导致临床大量应用受限。因此，我们将研究方向转至采用异体骨肉瘤细胞mRNA电转染DC的新型瘤苗制备与鉴定。本项目拟采用mRNA提取技术、免疫磁珠分离筛选技术、绿色荧光蛋白标记技术以及电转染等技术，观察异体大鼠骨肉瘤细胞mRNA经提取、纯化后，通过电穿孔技术转染DC，制备成异体骨肉瘤mRNA-DC瘤苗，探讨最佳的电转染条件，并检测该瘤苗在体外、体内诱导特异性抗骨肉瘤免疫效应，为基于临床应用的DC瘤苗的设计和制备提供切实的实验依据和新思路，建立一种有效可行的骨肉瘤生物治疗新方法。

中文关键词： 树突状细胞；骨肉瘤；免疫治疗；细胞毒性T淋巴细胞；

英文摘要：

英文关键词： dendritic cell；osteosarcoma；immunotherapy；cytotoxic T lymphocytes；