葡萄果实成熟发育过程液泡差异蛋白的甄别与功能鉴定解析液泡糖份单向优势运输和累积的实现

项目名称： 葡萄果实成熟发育过程液泡差异蛋白的甄别与功能鉴定解析液泡糖份单向优势运输和累积的实现

项目编号： No.31171939

项目类型： 面上项目

立项/批准年度： 2012

项目学科： 植物保护学、园艺学与植物营养学

项目作者： 马会勤

作者单位： 中国农业大学

项目金额： 52万元

中文摘要： 糖含量是葡萄品质最重要的基础指标。成熟期葡萄果肉细胞液泡内大量累积糖份，而始熟前液泡几乎无糖份累积。目前对启动和实现果肉细胞累糖的机理仍不清楚。葡萄基因组预测编码65个蔗糖和己糖转运蛋白，其中绝大多数的功能和亚细胞定位尚未验证，也未发现导致液泡大量累糖的关键功能蛋白。葡萄果肉细胞液泡随果实发育和成熟所发生的体积、双向跨膜转运活性及特征性蛋白质组成的决定性变化，是探索液泡最终实现糖份累积功能的关键。本项目依托差异荧光定量蛋白质组学和交叉免疫共沉淀技术，分离鉴定葡萄果实果肉细胞累糖前后液泡膜和液泡内差异蛋白；采用特异性抗体封闭、糖转运蛋白专一性抑制、同系底物竞争和放射性配体结合测定和免疫钓取技术，甄别不同时期液泡内向和外向糖份运输通量差异的调控蛋白，通过葡萄体细胞重组超表达体系验证累糖功能蛋白，深入解析决定葡萄成熟过程果肉细胞液泡实现累糖功能的关键作用蛋白，及其动力学特性与调控机理。

中文关键词： 葡萄果实；糖分累积；液泡；蛋白质组；差异表达

英文摘要：

英文关键词： grape berry；sugar accumulation；vacuole；proteome；differentical expression