木聚糖生物合成中的关键科学问题研究

项目名称： 木聚糖生物合成中的关键科学问题研究

项目编号： No.31170165

项目类型： 面上项目

立项/批准年度： 2012

项目学科： 微生物学、植物学

项目作者： 吴蔼民

作者单位： 华南农业大学

项目金额： 60万元

中文摘要： 木聚糖是微管束中次生加厚的主要成分之一，但木聚糖合成的分子机理仍不明确，目前仍然没有相关酶与底物反应的直接证据。本研究从拟南芥中克隆与木聚糖合成相关的多个基因， 利用酵母双杂交、BiFC（分离的YFP）以及免疫共沉淀技术来证明这些蛋白产物间的相互作用；同时在酵母内表达纯化这些蛋白或构建融合表达载体，转化各自的突变体，在恢复功能的突变体中纯化融合蛋白；在此基础上对纯化蛋白进行两两混合或3-4成分混合，然后测定其木糖转移酶活性，并比较主效基因酶复合体和次效基因酶复合体活性间的差异。对参与木聚糖合成的关键基因进行定位及功能比较，明确内质网和高尔基体在木聚糖合成中的作用。制备主要基因蛋白抗体，利用抗体验证基因的定位。对拟南芥中的木聚糖合成的模式推广，分析比较木材的同源基因。本研究将帮助我们进一步明确木聚糖合成及调控的分子机理，为木材的分子改良及调控提供理论和技术基础。

中文关键词： 木聚糖；木糖转移酶酶活活性；定位；复合体；机理

英文摘要：

英文关键词： xylan；xylosyltransferase activity；locolization；complex；biosynthesis mechanism