盖子结构调控高温脂肪酶催化特性机制研究

项目名称： 盖子结构调控高温脂肪酶催化特性机制研究

项目编号： No.21406076

项目类型： 青年科学基金项目

立项/批准年度： 2014

项目学科： 数理科学和化学

项目作者： 蓝东明

作者单位： 华南理工大学

项目金额： 25万元

中文摘要： 脂肪酶的盖子结构是影响酶催化效率的关键因素之一。本研究以Geobacillus sp.来源的高温脂肪酶T1为研究对象，围绕其盖子区域结构对酶催化活性调控的关键问题，采用丙氨酸扫描、定点饱和突变及基因片段替换等基因工程技术构建高温脂肪酶盖子区域突变体，并利用无细胞表达偶联微板活性检测技术筛选，获得影响高温酶催化特性的关键位点。并结合分子对接及分子动力学模拟等结构生物学方法分析，探讨酶催化特性差异与盖子区关键活性氨基酸位点的关联性。本研究顺利开展可以阐明盖子结构参与调控高温脂肪酶催化特性的机制，同时也为高温脂肪酶分子的理性设计和工程化应用提供理论指导。

中文关键词： 脂肪酶；盖子区；定点突变；生化表征；盖子区替换

英文摘要： Lid domain plays an important role on the catalytic efficiency of lipase. In this study, the lid domain of T1 lipase from Geobacillus sp. was chosen to investigate its function on catalytic property. Mutagenesis in lid domain of T1 lipase was performed by

英文关键词： lipase；lid domain；site directed mutation；biochemical characterization；Lid domain graft