玉米B染色体显微分离及其DNA文库构建研究

项目名称： 玉米B染色体显微分离及其DNA文库构建研究

项目编号： No.31371633

项目类型： 面上项目

立项/批准年度： 2013

项目学科： 农业科学

项目作者： 姚启伦

作者单位： 长江师范学院

项目金额： 78万元

中文摘要： B染色体是存在于许多生物体细胞内不同于正常染色体的小染色体，由于目前尚缺乏对其遗传机制和本质属性的认识，它仍是染色体遗传中的一个不解之迷。本研究立足于已有的研究基础，采用常规染色体制片技术，在玉米地方品种群体中细胞学鉴定、识别和定位B染色体；通过显微分离技术分离B染色体；分别用接头介导PCR(LA-PCR)和简并引物PCR（DOP-PCR）技术，体外扩增B染色体DNA；扩增产物（DNA片段）经分离、纯化及Southern杂交分析后，与质粒载体连接，再转化大肠杆菌细胞，在转化产物中挑取阳性克隆进行阳性鉴定和琼脂糖凝胶电泳检测；筛选出的阳性克隆用于构建玉米B染色体DNA文库。构建B染色体DNA文库可为全面剖析常染色体与B染色体的DNA序列差异、认识B染色体DNA本质和探讨B染色体的起源进化奠定物质基础，并有利于开发B染色体在基因工程中作为目标基因载体的潜能，进而创新植物遗传改良方法。

中文关键词： 玉米；B染色体；显微分离；PCR扩增；DNA文库

英文摘要： B chromosomes in cells, morphologically distinct from standard chromosomes (A chromosomes), are a puzzle in chromosomal inheritance. In this study, chromosome preparation are used to observe, identify, and locate B chromosomes in maize landraces. Their ge

英文关键词： maize；B chromosome；micro-isolation；DNA amplification；DNA library