恶臭假单胞菌扁桃酸消旋酶催化底物多样性产生机制的研究

项目名称： 恶臭假单胞菌扁桃酸消旋酶催化底物多样性产生机制的研究

项目编号： No.21176215

项目类型： 面上项目

立项/批准年度： 2012

项目学科： 化学工业

项目作者： 于洪巍

作者单位： 浙江大学

项目金额： 60万元

中文摘要： 消旋酶在手性药物制备中的应用前景十分广阔。但是，由于消旋酶种类较少且大多数催化底物类型单一，所以它们的应用受到了极大地限制。理论上分子改造手段可以有效地提高消旋酶的催化底物多样性，拓展其应用空间。然而目前消旋酶的催化底物多样性的产生机制仍不清楚，因此很难开展相关分子改造工作。对此，本项目将通过对恶臭假单胞菌扁桃酸消旋酶的分子改造和结构分析，深入地研究其催化底物多样性产生和变化的分子机制及结构基础。首先，通过分子对接模拟技术对扁桃酸消旋酶突变体进行虚拟筛选，了解关键位点各种氨基酸分子性质与酶催化底物多样性的关系；然后，通过定点突变技术对筛选所得的突变体进行构建；最后，结合X射线单晶衍射的方法对所构建的突变体进行结构解析，从而系统地阐述扁桃酸消旋酶催化底物多样性的产生机制，最终获得可催化多种底物的消旋酶制剂，并实现更多手性化合物的动态动力学拆分。该工作将为消旋酶的分子改造打下良好的理论基础。

中文关键词： 催化底物多样性；消旋酶；虚拟筛选；动态动力学拆分；

英文摘要：

英文关键词： substrate spectrum；racemase；virtual screening；dynamic kinetic resolution；