溶藻弧菌T3SS效应蛋白的鉴定及其致鱼类细胞死亡机制的研究

项目名称： 溶藻弧菌T3SS效应蛋白的鉴定及其致鱼类细胞死亡机制的研究

项目编号： No.31402344

项目类型： 青年科学基金项目

立项/批准年度： 2014

项目学科： 农业科学

项目作者： 庞欢瑛

作者单位： 广东海洋大学

项目金额： 25万元

中文摘要： 溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)是海水养殖动物弧菌病的重要致病菌之一。Ⅲ型分泌系统(T3SS)是弧菌的毒力装置，通过分泌效应蛋白(T3SEs)诱导宿主细胞死亡。虽然溶藻弧菌T3SS的装置蛋白得到了初步研究，但其效应蛋白及作用机制还未得到阐明。本项目在申请者已获得溶藻弧菌T3SS装置蛋白缺失株△vscO和△vscC与野生株的差异蛋白库的基础上，拟通过生物信息学、免疫印迹技术筛查潜在T3SEs；通过构建T3SEs真核重组表达载体并转染鱼类细胞，运用TUNEL、Caspase-3等细胞死亡的检测方法查明T3SEs的细胞毒性功能；将野生株、T3SEs基因缺失株和互补株转染鱼类细胞后，运用免疫共沉淀联合质谱测序方法初步研究T3SEs与鱼类细胞的作用机制，并绘制网络互作图谱。本研究结果将有助于揭示溶藻弧菌T3SS致鱼类细胞死亡的分子机理，也为寻找控制弧菌病的新分子靶标提供理论依据。

中文关键词： 溶藻弧菌；III型分泌系统；效应蛋白；细胞毒性；

英文摘要： The gram-negative bacterium Vibrio alginolyticus is one of marine Vibrio species that have been identified as pathogenic for marine animals. The type III secretion system (T3SS) is the main mechanisms to secret proteins, called effectors (T3SEs) which can

英文关键词： Vibrio alginolyticus；Type III secretion system(T3SS)；Type III secreted system effector proteins(T3SEs)；Cell toxicity；