化学污染物表观遗传毒性的EGFP评价方法研究

项目名称： 化学污染物表观遗传毒性的EGFP评价方法研究

项目编号： No.20907047

项目类型： 青年科学基金项目

立项/批准年度： 2010

项目学科： 轻工业、手工业

项目作者： 王先良

作者单位： 中国环境科学研究院

项目金额： 20万元

中文摘要： 人类基因启动子区DNA去甲基化可以导致下游基因的异常高表达，是化学污染物导致肿瘤等健康损害的表观遗传起始分子事件。评估化学污染物去甲基化能力是化学品安全性评价的新问题，目前国内外尚无相关表观遗传毒性评价的实用工具。利用增强型绿色荧光蛋白（EGFP）无毒、自发荧光、易于检测的特点，本项目将pEGFP-C3质粒进行甲基化修饰处理后，再转染进入人类HepG-2肝癌细胞株，并以该重组细胞株为工具评价化学污染物的表观遗传毒性。GFP基因启动子区DNA 甲基化水平降低，GFP蛋白表达量上升，绿色荧光增强；反之则GFP蛋白表达量下降和荧光减弱；化学物与该重组细胞株共培养后，通过细胞荧光强度变化可快速评估其致DNA甲基化改变的表观遗传毒性。本项目着眼于学科交叉，借助报告基因技术构建污染物去甲基化损害能力评价方法，是对化学污染物表观遗传毒性识别策略和研究工具的积极探索。

中文关键词： 去甲基化；表观遗传毒性；评价方法；污染物；EGFP

英文摘要：

英文关键词： Demethylation；Epigenetic toxicity；Evaluation method；Pollutants；EGFP