E.coli异柠檬酸脱氢酶分子进化机制的普遍性研究

项目名称： E.coli异柠檬酸脱氢酶分子进化机制的普遍性研究

项目编号： No.30870062

项目类型： 面上项目

立项/批准年度： 2009

项目学科： 生物科学

项目作者： 朱国萍

作者单位： 安徽师范大学

项目金额： 35万元

中文摘要： 通过异柠檬酸脱氢酶(IDH)的氨基酸序列比对及分析，利用蛋白质工程技术，将枯草杆菌NADP-依赖性的IDH(BsIDH)以及链球菌NAD-依赖性的IDH (SmIDH)中与辅酶特异性相关的保守氨基酸进行定点突变，使BsIDH和SmIDH的辅酶特异性分别转换成以NAD和以NADP为辅酶，以实验性数据验证E.coli的IDH功能进化的分子机制是具有普遍性的，不仅适用于革兰氏阴性细菌，也适用于革兰氏阳性细菌，为以后适用于真核生物IDH的研究奠定基础。另外通过细菌染色体同源重组，构建包含BsIDH和SmIDH编码基因的E.coli菌株，根据这些重组菌株在乙酸中生长的适应性变化，在细胞水平上进一步认识IDHs磷酸化调控作用的精细性，通过对IDHs磷酸化作用与IDHs功能进化的关系研究，为进一步探索和诠释乙醛酸旁路的起源与进化提供分子依据。

中文关键词： 异柠檬酸脱氢酶；辅酶特异性；功能进化；分子机制；普遍性

英文摘要：

英文关键词：