DNA甲基化修饰调控红豆杉细胞中紫杉醇合成的机理研究

项目名称： DNA甲基化修饰调控红豆杉细胞中紫杉醇合成的机理研究

项目编号： No.20906036

项目类型： 青年科学基金项目

立项/批准年度： 2010

项目学科： 生物科学

项目作者： 付春华

作者单位： 华中科技大学

项目金额： 20万元

中文摘要： 植物细胞培养过程中次生代谢产物产量不稳定，是制约其产业化的"瓶颈"。前期研究表明，红豆杉细胞培养过程中紫杉醇合成与DNA甲基化水平呈显著负相关。本研究拟以不同培养代数、去甲基化试剂处理的红豆杉细胞系为试材，采用双向电泳-质谱技术分离并鉴定差异表达蛋白，利用RT-PCR及 Ms-SnuPE定量分析差异表达蛋白在培养过程中的表达水平及甲基化水平，进而明析红豆杉细胞培养过程中与紫杉醇生物合成有关的蛋白谱，筛选与紫杉醇生物合成下降相关的甲基化失活基因。项目实施后，一方面可解析DNA甲基化调控红豆杉离体培养细胞中紫杉醇生物合成的机制，丰富人们对真核生物基因表达调控的认识；另一方面有助于揭示红豆杉细胞培养过程中次生代谢物含量下降机制，为高产细胞系的合理利用及寻找相关调控措施，建立细胞系稳定传代的方法工艺提供理论依据。项目的完成对于其它药用植物利用细胞大规模培养稳定生产次生代谢产物有很好的指导意义。

中文关键词： 红豆杉细胞；紫杉醇；DNA甲基化；调控机理；蛋白质组学

英文摘要：

英文关键词： Taxus cell；taxol；DNA methylation；Regulation mechanism；Proteomics